ⅠNasam ukleatipambuka
Asam nukleat dipérang dadi asam deoksiribonukleat (DNA) lan asam ribonukleat (RNA), ing antarané RNA dipérang dadi RNA ribosom (rRNA), RNA messenger (mRNA) lan RNA transfer (tRNA) miturut fungsi sing béda-béda.DNA utamané klempakan ing nukleus, mitokondria lan kloroform, nalika RNA utamané disebaraké ing sitoplasma.Minangka basis materi ekspresi gen, ekstraksi asam nukleat nduweni peran penting banget ing riset biologi molekuler lan diagnosa molekuler klinis.Konsentrasi lan kemurnian ekstraksi asam nukleat bakal langsung mengaruhi PCR, urutan, konstruksi vektor, pencernaan enzim lan eksperimen liyane.
Ⅱ Metode ekstraksi lan pemurnian asam nukleat
① Metode ekstraksi fenol/kloroform
Ekstraksi fenol/kloroform minangka cara klasik kanggo ekstraksi DNA, sing utamane nggunakake rong pelarut organik sing beda kanggo ngobati conto, larut asam nukleat adhedhasar DNA ing fase banyu, lipid ing fase organik, lan protein ing antarane rong fase kasebut.Cara iki nduweni kaluwihan biaya murah, kemurnian dhuwur lan efek apik.Kerugian yaiku operasi sing rumit lan wektu sing suwe.
② Metode Trizol
Metode Trizol minangka metode klasik kanggo ekstraksi RNA.Cara Trizol dipérang dadi fase banyu lan fase organik sawisé sentrifugasi karo kloroform, ing ngendi RNA dibubaraké ing fase banyu, fase banyu ditransfer menyang tabung EP anyar, udan dipikolehi sawise nambah isopropanol, lan banjur pemurnian etanol.Cara iki cocok kanggo ekstraksi RNA saka jaringan kewan, sel lan bakteri.
③ Metode pemurnian kolom sentrifugal
Cara pemurnian kolom centrifuge bisa adsorb DNA khusus liwat bahan adsorpsi matriks silikon khusus, dene RNA lan protein bisa dilewati kanthi lancar, banjur nggunakake PH kurang uyah dhuwur kanggo nggabungake asam nukleat, elusi nilai PH dhuwur uyah kanggo misahake lan ngresiki asam nukleat.Kaluwihan kasebut yaiku konsentrasi pemurnian sing dhuwur, stabilitas sing dhuwur, ora perlu pelarut organik, lan biaya sing murah.Kerugian iku kudu centrifuged langkah dening langkah, langkah operasi liyane.
④ Metode manik-manik magnetik
Cara manik magnetik yaiku pamisah sampel jaringan sel liwat lysate, ngeculake asam nukleat ing sampel, banjur molekul asam nukleat khusus diserap ing permukaan manik magnetik, dene impurities kayata protein lan gula ditinggalake ing cairan kasebut.Liwat langkah-langkah pemisahan jaringan sel, ikatan manik magnetik karo asam nukleat, cuci asam nukleat, elusi asam nukleat, lan liya-liyane, asam nukleat murni pungkasane dipikolehi.Kaluwihan iku operasi prasaja lan nggunakake wektu cendhak, tanpa perlu centrifugation langkah.Wis syarat technical kurang lan bisa éling operasi otomatis lan massa.Kombinasi spesifik manik magnetik lan asam nukleat ndadekake asam nukleat sing diekstrak kanthi konsentrasi lan kemurnian sing dhuwur.Kekurangane yaiku rega pasar saiki relatif larang.
⑤ Cara liya
Saliyane ing papat cara ing ndhuwur, ana cara nggodhok, metode uyah pekat, metode deterjen anionik, metode ultrasonik lan metode enzimatik, lsp.
Ⅲ Jinis ekstraksi asam nukleat
Foregene duwe platform PCR Langsung sing unggul ing donya, platform Isolasi RNA kolom pindho (mung DNA + mung RNA ).Produk utama kalebu kit isolasi DNA/RNA, PCR lan reagen PCR langsung seri reagen laboratorium molekuler.
① Ekstraksi RNA total
Sampel ekstraksi total RNA kalebu getih, sel, jaringan kewan, tanduran, virus, lan liya-liyane. kloning molekuler, Dot Blot lan eksperimen liyane.
Foregene relatedKit Isolasi RNA
Kit Isolasi RNA Total Kewan--Cepet lan efisien extract RNA total kemurnian lan kualitas dhuwur saka macem-macem jaringan kewan.
Kit Isolasi RNA Total Sel--RNA total sing diresiki lan berkualitas tinggi bisa dipikolehi saka macem-macem sel kultur sajrone 11 menit.
Kit Isolasi RNA Total Tanduran--Ekstrak RNA total kanthi cepet saka sampel tanduran kanthi kandungan polisakarida lan polifenol sing sithik.
Kit Isolasi RNA Virus--Cepet ngisolasi lan ngresiki RNA virus saka conto kayata plasma, serum, cairan awak tanpa sel lan supernatan kultur sel.
② Ekstraksi DNA genom
Sampel ekstraksi DNA genom kalebu lemah, feces, getih, sel, jaringan kewan, tetanduran, virus, lan liya-liyane. Ekstraksi DNA genom bisa digunakake ing pencernaan enzim, konstruksi perpustakaan DNA, PCR, persiapan antibodi, analisis hibridisasi Western blot, chip gen, dhuwur -urutan throughput lan eksperimen liyane.
Foregene relatedKit Isolasi DNA
Kit Isolasi DNA Jaringan HewanEkstraksi lan pemurnian DNA genom saka macem-macem sumber, kayata jaringan kewan, sel, lsp.
Kit Midi DNA Darah (1-5ml)--Cepet ngresiki DNA genomik bermutu tinggi saka getih antikoagulasi (1-5ml).
Kit Isolasi DNA Buccal Swab/Kartu FTA--Cepet ngresiki DNA genomik berkualitas tinggi saka sampel buccal swab/FTA Card.
Kit Isolasi DNA Tumbuhan--Cepet ngresiki lan entuk DNA genom sing berkualitas tinggi saka conto tanduran (kalebu polisakarida lan conto tanduran polifenol)
③ Ekstraksi plasmid
Plasmid minangka jinis DNA molekul cilik bunder ing sel, sing minangka pembawa umum kanggo rekombinasi DNA.Cara ekstraksi plasmid yaiku mbusak RNA, misahake plasmid saka DNA genomik bakteri, lan mbusak protein lan impurities liyane kanggo entuk plasmid sing relatif murni.
Umum Plasmid Mini Kit--Cepet ngresiki DNA plasmid berkualitas tinggi saka bakteri sing diowahi kanggo eksperimen biologi molekuler rutin kayata transformasi lan pencernaan enzim
④ Jinis ekstraksi liyane, ekstraksi miRNA, lsp.
Kit Isolasi miRNA kewan--Cepet lan efisien ekstrak fragmen RNA cilik saka 20-200nt miRNA, siRNA, snRNA saka macem-macem jaringan lan sel kewan
Ⅳ Syarat kanggo ekstraksi asam nukleat lan asil pemurnians
① Kanggo njamin integritas struktur utama asam nukleat.
② Ngurangi interferensi protein, gula, lipid lan makromolekul liyane
③ Aja ana pelarut organik utawa konsentrasi ion logam sing dhuwur sing bisa nyandhet enzim ing conto asam nukleat.
④ RNA lan kontaminasi asam nukleat liyane kudu diilangi nalika ngekstrak DNA, lan kosok balene.
Wektu kirim: Nov-24-2022
